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第1章　概论1

1.1　花卉产业发展的特点1

1.1.1 主要花卉的种植面积2

1.1.2　花卉的经济价值2

1.1.3　花卉产业发展的潜力6

1.2　丰富的花卉资源8

1.2.1 丰富的花卉种类8

1.2.2　丰富的热带种质资源及利用11

1.3　花卉育种进展12

1.3.1 传统育种研究进展13

1.3.2　生物技术育种研究进展16

本章参考文献31

第2章　目的基因的克隆34

2.1　植物基因的结构与功能34

2.1.1 植物基因的结构特点34

2.1.2　植物基因的功能36

2.2　植物基因的克隆策略36

2.2.1 基因芯片技术分离目的基因36

2.2.2　基因文库技术分离目的基因（基因组文库和cDNA文库）40

2.2.3　PCR技术克隆目的基因41

2.2.4　mRNA差别显示技术分离差异表达的目的基因42

2.2.5 插入突变技术克隆目的基因48

本章参考文献53

第3章　目的基因的遗传转化55

3.1　受体系统的建立及特性55

3.1.1　愈伤组织再生系统55

3.1.2　直接分化再生系统55

3.1.3　原生质体再生系统55

3.1.4　胚状体再生系统56

3.1.5 生殖细胞受体系统56

3.2　载体构建56

3.2.1 载体的种类及特性56

3.2.2　植物表达载体的构建56

3.3　根癌农杆菌介导的转化60

3.3.1 根癌农杆菌的特点60

3.3.2 农杆菌介导的T-DNA的插入机理60

3.3.3　T-DNA在植物基因组中的整合及染色体水平上的分布61

3.3.4　根癌农杆菌的转化策略64

3.3.5 根癌农杆菌的转化方法66

3.4　DNA直接导入基因转化67

3.4.1 基因枪法67

3.4.2　PEG介导基因转化68

3.4.3　脂质体介导基因转化68

3.4.4　花粉管导入法69

3.5　转基因表达的类型69

3.5.1　组成型表达70

3.5.2　诱导型表达70

3.5.3 基因瞬时表达和稳定表达72

3.6　外源基因在转基因植物中的表达特点73

3.6.1 外源基因插入拷贝数、插入位点与排列73

3.6.2　外源基因表达序列特征74

3.6.3 外源基因表达的沉默75

3.6.4　环境因素对转基因表达活性的影响77

3.7　无选择标记基因的转化系统77

3.7.1 无毒选择标记系统获得转基因植物78

3.7.2　标记基因的去除78

3.8　提高转基因表达水平的若干技术途径79

3.8.1 启动子及终止子的修饰改造79

3.8.2　转基因的修饰与改造80

3.8.3 使用植物偏爱的密码子81

3.8.4　蛋白质的定向运输82

本章参考文献83

第4章　转基因植物的检测与鉴定85

4.1　报告基因的检测85

4.1.1 葡糖醛酸酶基因（gus）的检测85

4.1.2　绿色荧光蛋白基因（gfp）的检测86

4.1.3 绿霉素乙酰转移酶基因（cat）的检测86

4.1.4 荧光霉素基因的检测86

4.1.5 花青素基因的检测86

4.2　外源基因的PCR检测87

4.2.1 外源基因整合的PCR-Southern杂交检测87

4.2.2　外源基因拷贝数的IPCR检测87

4.2.3 外源基因表达的RT-PCR检测87

4.3　外源基因的Southern blot检测89

4.3.1 Southern斑点杂交89

4.3.2 Southern印迹杂交89

4.4　外源基因的Northern blot检测89

4.5　外源基因表达蛋白的检测（Western）90

4.5.1 ELISA检验90

4.5.2 Western杂交90

4.6　外源基因整合及表达的原位杂交检测91

4.6.1 染色体DNA原位杂交91

4.6.2　组织细胞mRNA原位杂交92

4.6.3 外源基因表达蛋白的组织细胞免疫定位94

本章参考文献96

第5章　花卉基因工程97

5.1　花色基因工程97

5.1.1 花色形成的原理97

5.1.2 重要花色基因的克隆及基因工程方法98

5.1.3　外源花色基因改变植物花色的转化及检测方法101

5.1.4　应用103

5.2　花形基因工程104

5.2.1 影响花形的因素104

5.2.2　重要功能基因的克隆105

5.2.3　转化及检测106

5.2.4　应用106

5.3　利用基因工程增加花卉的香味112

5.3.1　花香释放的机理112

5.3.2　重要花香基因的克隆113

5.3.3 外源基因的导入及表达115

5.3.4　应用116

5.4　利用基因工程增强花卉的抗逆性116

5.4.1　抗性基因工程育种的原理118

5.4.2 重要抗性功能基因的克隆、载体构建及转化120

5.5　利用基因工程延长花卉的保鲜期122

5.5.1 花卉采后保鲜的原理122

5.5.2　与采后保鲜相关的重要功能基因的克隆、载体构建及转化123

5.5.3　应用124

5.6　利用基因工程改变花期125

5.6.1 花期控制的分子生物学基础125

5.6.2 重要功能基因的克隆、载体构建及转化125

5.6.3　应用125

5.7　花卉的功能基因组学的研究128

5.7.1 功能基因组学研究进展128

5.7.2　功能基因组学在花卉育种中的应用135

本章参考文献136

第6章　重要花卉基因工程应用142

6.1　热带兰花142

6.1.1 蝴蝶兰143

6.1.2　石斛兰145

6.1.3 大花蕙兰147

6.1.4 文心兰148

6.1.5 问题与展望149

6.2　非洲菊149

6.2.1 非洲菊的经济价值149

6.2.2　基因工程在非洲菊上的应用150

6.3　安祖花154

6.3.1　安祖花的经济价值154

6.3.2　安祖花的离体再生154

6.4　百合155

6.4.1 百合的经济价值155

6.4.2　基因工程在百合上的应用157

6.5　香石竹164

6.5.1　香石竹的经济价值164

6.5.2　病毒病危害与脱毒164

6.5.3　基因工程在香石竹上的应用166

6.6　月季167

6.6.1 月季的经济价值167

6.6.2 月季的离体再生体系的建立168

6.6.3　月季的遗传转化170

6.7　菊花172

6.7.1 菊花的经济价值172

6.7.2　菊花的离体再生172

6.7.3　菊花的遗传转化173

6.8　观赏凤梨174

6.8.1 观赏凤梨的经济价值174

6.8.2　观赏凤梨的离体再生175

本章参考文献177

第7章　转基因植物（食品）安全性184

7.1　转基因植物（食品）产业发展趋势184

7.2　转基因植物（食品）的潜在风险与生物安全性185

7.2.1 转基因植物释放引发“超级杂草”185

7.2.2 转基因植物中35S启动子的生物安全性185

7.2.3 载体骨架序列的生物安全性186

7.2.4　抗生素抗性标记基因的生物安全性186

7.2.5 转基因食品的安全性187

7.3　主要应对措施187

7.3.1 完善转基因植物（食品）的安全性评价体系187

7.3.2　加强我国的生物安全性研究190

7.3.3 采取有效的生物安全控制措施190

7.3.4 建立健全生物安全管理体制的法规体系192

7.3.5　对转基因产品标识的管理193

7.3.6　理性认识转基因植物（食品）的安全性197

本章参考文献199

附录：缩写词表（Abbreviation）201