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1绪论1

1.1 白桦的研究概况1

1.2 植物内源激素的研究进展2

1.2.1 内源激素种类2

1.2.2 内源激素提取分离方法的研究进展4

1.2.3 内源激素检测方法的研究进展6

1.3 植物内源激素生物合成途径的研究进展8

1.3.1 赤霉素生物合成途径的研究进展8

1.3.2 脱落酸生物合成途径的研究进展8

1.3.3 吲哚乙酸生物合成途径的研究进展11

1.4 植物内源激素生物合成关键酶及其基因12

1.4.1 赤霉素生物合成关键酶及其基因12

1.4.2 脱落酸生物合成关键酶及其基因16

1.5 生长素早期响应基因GH317

1.6 自然条件生长白桦的激素研究概况18

1.7 本研究的目的与意义20

2内源激素提取方法研究21

2.1 材料与方法21

2.1.1 材料21

2.1.2 方法23

2.2 结果与分析25

2.2.1 提取溶剂的选择25

2.2.2 提取溶剂浓度的选择25

2.2.3 淋洗液的选择26

2.2.4 洗脱液的选择27

2.2.5 酸化洗脱液的选择27

2.3 讨论28

2.4 本章小结29

3激素HPLC-PAD检测方法建立30

3.1 材料与方法30

3.1.1 材料30

3.1.2 HPLC-PAD检测方法32

3.1.3 HPLC-PAD检测方法学验证34

3.1.4 数据处理方法34

3.2 结果与分析34

3.2.1 四种激素的紫外特征吸收34

3.2.2 HPLC-PAD方法建立37

3.3 讨论45

3.4 本章小结45

4激素含量 LC-MS/MS检测方法建立47

4.1 材料与方法47

4.1.1 材料47

4.1.2 LC-MS/MS检测方法49

4.1.3 LC-MS/MS检测方法学验证51

4.1.4 数据处理方法52

4.2 结果与分析52

4.2.1 LC-MS/MS检测方法建立52

4.2.2 检测激素含量的LC-MS/MS方法学验证60

4.2.3 样品中各种激素含量的计算方法62

4.3 讨论63

4.4 本章小结64

5白桦内源赤霉素含量及合成关键基因的表达分析65

5.1 材料与方法65

5.1.1 材料65

5.1.2 实验方法68

5.1.3 内源GA3和GA4含量的时序变化分析72

5.1.4 基因的克隆与分析77

5.2 讨论80

5.2.1 内源GA3和GA4含量变化分析80

5.2.2 内源GA生物合成关键基因时序表达分析81

5.3 本章小结82

6白桦内源脱落酸含量及合成关键基因的表达分析83

6.1 材料与方法83

6.1.1 材料83

6.1.2 实验方法86

6.2 结果与分析89

6.2.1 内源ABA含量的时序变化分析89

6.2.2 基因的克隆及表达分析90

6.2.3 ABA含量与调控ABA合成关键基因表达量相关性分析93

6.3 讨论93

6.3.1 内源ABA含量变化分析93

6.3.2 内源ABA生物合成关键基因时序表达分析94

6.4 本章小结95

7白桦内源吲哚乙酸含量和BpGH3基因家族的表达分析97

7.1 材料与方法97

7.1.1 材料97

7.1.2 实验方法100

7.2 结果与分析103

7.2.1 内源IAA含量的时序变化分析103

7.2.2 基因的克隆与分析104

7.2.3 生长素响应基因BpGH3家族的表达与IAA含量相关性分析105

7.3 讨论107

7.3.1 内源IAA水平时序变化分析107

7.3.2 生长素响应基因BpGH3的克隆与分析108

7.4 本章小结109

8结论110

参考文献113

编后记121