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医学微生物学实验室生物安全1

医学微生物学实验的目的与要求5

医学微生物学实验室规则6

第一篇 细菌学实验9

第一章 细菌的染色与形态、结构观察9

实验一 油镜显微镜的使用及细菌形态结构的观察9

实验二 细菌涂片标本的制备及简单染色法12

实验三 细菌的革兰染色法15

实验四 细菌特殊结构（芽胞、荚膜、鞭毛）的染色法17

实验五活菌运动观察22

第二章 细菌的培养及其生化代谢产物的检查24

实验六 细菌培养基的制备与灭菌实验24

实验七 细菌的分离接种技术与培养方法27

实验八 细菌培养物的性状观察36

实验九 糖发酵实验38

实验十 蛋白质代谢实验41

实验十一 其他代谢实验43

第三章 细菌的遗传与变异及耐药性实验45

实验十二 噬菌体裂解细菌实验45

实验十三 细菌的形态变异实验（L型、H-O变异、S-R变异）49

实验十四 细菌的药物敏感性实验（纸片法、试管法）52

实验十五 细菌耐药性质粒转化实验（化学转化和电转化）56

第四章 动物实验60

实验十六 小鼠腹腔接种方法——金黄色葡萄球菌小鼠腹腔接种方法60

实验十七 小鼠尸体解剖与细菌学检查—金黄色葡萄球菌感染小鼠尸体解剖与细菌学检查63

第五章 环境、体表细菌的检查及消毒与灭菌实验66

实验十八 空气中细菌的检测（沉降法）66

实验十九 正常人体皮肤及随身物品细菌的检查68

实验二十 鼻咽腔及口腔中细菌的检查71

实验二十一 消毒与灭菌实验72

第六章 病原性球菌78

实验二十二 病原性球菌的形态、染色性及培养特性78

实验二十三 葡萄球菌血浆凝固酶实验80

实验二十四 抗链球菌溶血素“O”（ASO）实验——乳胶凝集法82

实验二十五 肺炎链球菌胆汁溶解实验83

实验二十六 病原性球菌脓汁标本的检验84

第七章 肠道杆菌87

实验二十七 粪便标本的检验87

实验二十八 肥达反应93

第八章 霍乱弧菌和幽门螺杆菌95

实验二十九 霍乱弧菌、副溶血弧菌的检验95

实验三十 幽门螺杆菌、空肠弯曲菌的检验98

第九章 呼吸道感染细菌的检验101

实验三十一 结核分枝杆菌的检验101

实验三十二 白喉棒状杆菌的检验107

第十章 厌氧性细菌的检验111

实验三十三 厌氧芽胞梭菌的形态、染色性及培养特性111

实验三十四 无芽胞厌氧菌的形态、染色性及培养特性114

实验三十五 破伤风外毒素与抗毒素中和实验116

实验三十六 产气荚膜梭菌动物实验117

实验三十七 临床标本厌氧菌的分离培养与鉴定118

第十一章 动物源性细菌的检验123

实验三十八 炭疽芽胞杆菌的检验123

实验三十九 布鲁菌的检验126

实验四十 鼠疫耶尔森菌的检验128

第二篇 病毒学实验133

第十二章 病毒的形态学观察133

实验四十一 电子显微镜观察负染病毒133

实验四十二 病毒包涵体的检查136

第十三章 病毒的分离培养139

实验四十三 病毒的组织细胞培养方法139

实验四十四 病毒的鸡胚培养方法143

实验四十五 病毒的动物接种146

第十四章 病毒的感染性定量测定148

实验四十六 病毒组织半数感染量（TCID50）的测定148

实验四十七 病毒的空（蚀）斑形成实验152

第十五章 病毒抗原的检测155

实验四十八 直接免疫荧光实验155

实验四十九 酶联免疫吸附实验——双抗体夹心法157

实验五十 免疫印迹159

第十六章 病毒抗体的检测163

实验五十一 血凝实验与血凝抑制实验163

实验五十二 补体结合实验166

实验五十三 酶联免疫吸附实验168

实验五十四 病毒中和实验171

第十七章 病毒核酸的检测173

实验五十五 聚合酶链反应定性检测病毒核酸173

实验五十六 荧光定量PCR检测病毒核酸175

实验五十七 原位杂交法检测病毒核酸178

第三篇 真菌学实验183

实验五十八 真菌的培养及形态观察183

实验五十九 真菌病临床标本的直接镜检与染色观察185

实验六十 真菌DNA快速提取及18S rDNA序列测定鉴定187

第四篇 其他病原微生物实验193

实验六十一 支原体的检验193

实验六十二 衣原体的检验197

实验六十三 钩端螺旋体的检验201

实验六十四 立克次体的检验206

实验六十五 放线菌的检验209

第五篇 基本分子微生物学技术215

实验六十六 重组质粒构建215

实验六十七 外源性蛋白的重组表达220

实验六十八 细菌基因敲除技术231

实验六十九 转座子技术242

实验七十 荧光定量PCR245

实验七十一 菌群分析252

附录259

微生物学实验室常用的试剂259

一、常用染色液的配制259

二、常用培养基的制备259

三、常用试剂和溶液的配制267

四、洗涤液的配制与使用271

五、常用消毒液和清洁液的配制法272

菌种保藏275

一、传代培养保藏法275

二、液体石蜡覆盖保藏法275

三、载体保藏法276

四、悬液保藏法277

五、寄主保藏法278

六、冷冻保藏法278

实验动物管理281